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首页 >> 產(chǎn)品展示 >>切片機(jī) >>振動(dòng)切片機(jī) >> 國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī) ZQP-86 新鮮組織切片專(zhuān)用 上海之信 可申請(qǐng)樣機(jī)試切 短期租賃
详细说明

國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī) ZQP-86 新鮮組織切片專(zhuān)用 上海之信 可申請(qǐng)樣機(jī)試切 短期租賃

可以定制全自動(dòng)振動(dòng)切片機(jī),樣品直徑和長(zhǎng)度范圍為0到幾十厘米,申請(qǐng)定制機(jī)器或者標(biāo)準(zhǔn)樣機(jī)試切請(qǐng)加微信17301696315

商品名稱(chēng)
振動(dòng)切片機(jī)-ZQP-86
商品編號(hào)
ZQP-86
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產(chǎn)品介紹

振動(dòng)切片機(jī) ZQP-86 新鮮組織切片專(zhuān)用 可申請(qǐng)樣機(jī)試切或短期租賃

1 產(chǎn)品用途
   國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)ZQP-86,功能和效果好,性?xún)r(jià)比高,主要特點(diǎn):振動(dòng)刀頭結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,更易清潔或更換,簡(jiǎn)單沖刷就可去除殘留物,避免不同實(shí)驗(yàn)后造成細(xì)胞死亡或者樣品污染采用電磁控制振動(dòng)機(jī)構(gòu)相較于電機(jī)驅(qū)動(dòng)的機(jī)械振動(dòng)機(jī)構(gòu),結(jié)構(gòu)更為簡(jiǎn)潔緊湊,長(zhǎng)期使用后也不存在疲勞磨損和間隙增大等問(wèn)題,后期維護(hù)成本低,機(jī)器工作更穩(wěn)定。廣泛地應(yīng)用于科研、教學(xué)、化工、醫(yī)療衛(wèi)生等單位30余年。振動(dòng)切片機(jī)1988年亮相于中國(guó)解剖學(xué)會(huì)神經(jīng)解剖學(xué)和組織學(xué)胚胎學(xué)兩個(gè)學(xué)術(shù)年會(huì)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),截止2019年國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)目前客戶(hù)主要集中在國(guó)內(nèi)各大科研院校,同時(shí)也已發(fā)展到全球各大研究院校,Indiana University,USA;Murdoch University,Australia;University of Toronto, Canada(切片厚度 80um);Universidad de Granada,Spain;University of 

Brasilla,F(xiàn)ederal University of Santa Maria, Brazil(2017-2019年文獻(xiàn) 切片厚度30-50um);Universidad Peruana Cayetano Heredia,Peru(切片厚度 50um);Centre of Biotechnology of Borj Cedria,Tunisia(切片厚度 15um)等,發(fā)表幾百篇中英文期刊和論文。

        文獻(xiàn)涉及研究領(lǐng)域包含:生理學(xué)、神經(jīng)科學(xué)/神經(jīng)化學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)、組織化學(xué)/ 細(xì)胞化學(xué),電鏡級(jí)的酶化學(xué)、組織病理學(xué)的組織切片、植物學(xué)(園藝科學(xué)、繁殖、研究、植物病理)、再生醫(yī)學(xué)/組織工程學(xué)、組織培養(yǎng)、以及其它需要活體組織切片來(lái)做研究的領(lǐng)域。振動(dòng)切片機(jī)特別適用于切新鮮的或經(jīng)過(guò)瓊脂固定的動(dòng)、植物標(biāo)本,切片時(shí)組織標(biāo)本不需冰凍或包埋。為了更好地服務(wù)科研,本公司同時(shí)推出租賃和采購(gòu)兩種合作方式以適應(yīng)不同周期的研究項(xiàng)目,并推出全系列科研切片機(jī),覆蓋樣品質(zhì)地從軟到硬排序,解決不同質(zhì)地、不同尺寸樣品和個(gè)性化切片實(shí)時(shí)成像定制服務(wù):

不可包埋的新鮮樣品(動(dòng)植物樣品和軟材料),低濃度瓊脂包埋樣品(細(xì)長(zhǎng)和大尺寸樣品等),石蠟包埋樣品,冰凍樣品,再到質(zhì)地較硬的樣品,新鮮樹(shù)苗,中藥材、木材、塑料、橡膠、化學(xué)纖維、復(fù)合封裝材料等較硬的非金屬樣品,骨頭和金屬等堅(jiān)硬樣品,歡迎來(lái)電17301696315咨詢(xún)。


動(dòng)物組織切片案例

1.切小鼠前額葉皮層,做腦片膜片鉗:p2M 大小鼠,冰的液體心臟灌流,取腦,固定,切片,整個(gè)過(guò)程通混合氣,腦片厚度300um,完成后室溫孵育1h,膜片鉗記錄。

2. SD乳鼠,取腦,固定,切片,整個(gè)過(guò)程通混合氣,腦片厚度400um,完成后34℃恢復(fù)30min,30℃孵育1h,膜片鉗記錄。

3. 切大小鼠腦片,做腦片電信號(hào)檢測(cè)用:8周C57小鼠/大鼠海馬,取腦,固定,切片,整個(gè)過(guò)程通混合氣,腦片厚度300-400um,完成后34℃恢復(fù)30min,30℃孵育1h,膜片鉗記錄。

4. 做小鼠海馬腦切片,做全細(xì)胞膜片鉗記錄,切片厚度300-400um。

5. 切SD成年大鼠腦片,進(jìn)行代謝酶活性測(cè)定:SD大鼠,取腦,固定,切片,整個(gè)過(guò)程通混合氣,腦片厚度300um,完成后37℃恢復(fù)30min,加入探針底物,37℃孵育0.5h。

6. 小鼠,預(yù)冷4%多聚甲醛心臟灌流,取腦,固定,腦組織垂直包埋于T型瓊脂糖凝膠內(nèi),上下面平行,切片切面與腦組織垂直,腦片厚度200μm,完成后50度孵育染料15分鐘,切小鼠矢狀面/冠狀面切片,做尼氏染色,顯微鏡下觀(guān)察。

7. 小鼠腦組織、果蠅全身切片,組織先經(jīng)固定后包埋在5%的瓊脂糖中,切片厚度25-50um,切片后用于免疫染色。

8. 8w C57小鼠經(jīng)生理鹽水心臟灌流后,取肺、心臟、腎臟、肝臟等組織并用瓊脂糖包埋,300um振動(dòng)切片后熒光探針染色,于顯微鏡下觀(guān)察活體組織成像并拍照。

9. 切小鼠腦片,培養(yǎng)成像 蛋白探針 無(wú)菌環(huán)境:ICR小鼠,厚度200-400um,培養(yǎng)箱培養(yǎng)72h。

10. 切豬的心臟組織,測(cè)試效果:取豬的新鮮心臟組織,置于UW保護(hù)液中,將心臟組織切成1cm3見(jiàn)方,固定于底座上,切片厚度300µm。切好的組織用于原代心肌細(xì)胞分離提取。

11. 切C57一周鼠腦片,做腦片培養(yǎng)用:C57一周齡乳鼠,取腦,固定,切片,整個(gè)過(guò)程通混合氣,腦片厚度300um,完成后37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng),進(jìn)行后續(xù)免疫熒光,高爾基染色等。

12. 切SD大鼠皮膚、腫瘤樣本,染色:實(shí)體瘤/大鼠皮膚,固定,切片,厚度150um,染色。

13. C57BL/6成年小鼠,處死,取心、肝、腎、肺、腦,切片,厚度100 um。

14. 切C557BL/6J小鼠肺組織:取小鼠肺組織固定,用2%低熔點(diǎn)瓊脂糖(2%濃度流動(dòng)性好灌注效果好,4%濃度偏高灌注效果略差)進(jìn)行固定,冰浴,然后對(duì)肺組織進(jìn)行100μm、200μm、300μm切片,完成后取切片進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

15. 切小鼠腦組織,放在冷凍電鏡下觀(guān)察:小鼠,取腦,切片,整個(gè)過(guò)程通混合氣,腦片厚度100um,完成后高壓冷凍。

16. 切腦、肝、肺、腎、肌肉、腫瘤組織等,進(jìn)行玻璃化活性保存:小鼠取腦、肝、肺、腎、肌肉、腫瘤組織,固定,切片,切片厚度500um-1mm,完成后進(jìn)行玻璃化灌流、液氮降溫、玻璃化復(fù)溫后,進(jìn)行活細(xì)胞檢測(cè)及類(lèi)器官培養(yǎng);


植物組織切片案例:

  1. 水稻及擬南芥的PI木質(zhì)素/纖維素/木栓質(zhì)染色后的根部進(jìn)行橫切,觀(guān)察凱式帶結(jié)構(gòu)的變化,樣品種類(lèi):水稻及擬南芥等根組織,取處理好植株的根部進(jìn)行橫切,厚度50-100um,切片后顯微鏡觀(guān)察。下圖來(lái)自于湖北大學(xué)

水稻14天根切片 熒光染色結(jié)果.png

2. 取處理好的擬南芥莖/根組織進(jìn)行橫切,厚度50-100um,切片后顯微鏡觀(guān)察:取處理好的擬南芥莖/根組織進(jìn)行橫切,厚度50-100um,切片后顯微鏡觀(guān)察。

3. 水稻GUS染色脫色后的葉片進(jìn)行橫切,觀(guān)察維管和葉肉細(xì)胞:水稻及玉米等葉組織,取處理過(guò)得葉片進(jìn)行橫切,厚度30-50um,切片后顯微鏡觀(guān)察。

4. 擬南芥、水稻花器官切片實(shí)驗(yàn)與觀(guān)察。

5. 豆科植物根瘤組織切片實(shí)驗(yàn)與觀(guān)察。

6. 楊樹(shù)2-4個(gè)月莖組織,取楊樹(shù)莖鮮樣進(jìn)行橫切,厚度30um,切片臺(tái)盼藍(lán)染色后顯微鏡觀(guān)察。

7. 楊樹(shù)根組織切片檢驗(yàn)與觀(guān)察,做DPI熒光染色:楊樹(shù)根組織,取楊樹(shù)根鮮樣,進(jìn)行瓊脂糖包埋后橫切,厚度20um,切片DPI染色后顯微鏡觀(guān)察

8. 對(duì)轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)鮮材2月莖段橫切片及縱向切片,厚度50-100um,染色后觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和在confocal下觀(guān)察不同熒光。

9. 三葉鬼針草根部切片,觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)變化:取處理好的三葉鬼針草根橫切,厚度50-100um,切片后顯微鏡觀(guān)察。

10.水稻根部切片,進(jìn)行原位PCR實(shí)驗(yàn):水稻根部橫切,厚度50-100um,F(xiàn)AA固定液固定,后續(xù)進(jìn)行原位PCR。 


11.異子蓬葉片橫切進(jìn)行FB28/FDA/DAPI/ Rhodamine 123熒光染色觀(guān)察葉綠體發(fā)育變化。異子蓬葉片組織,取處理好植株的葉部進(jìn)行橫切,厚度100um,切片后共聚焦顯微鏡觀(guān)察。下圖由新疆大學(xué)提供

新疆大學(xué) 異子蓬葉片組織 100um 共聚焦顯微鏡觀(guān)察.jpg


 振動(dòng)切片機(jī)操作演示視頻 https://v.youku.com/v_show/id_XMjg2MTYzMzMxNg==.html

    

大鼠腦片制備與觀(guān)察 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程-北京大學(xué)


南京醫(yī)科大學(xué) 不包埋腦切片視頻 用于膜片鉗


    30um大鼠腦切片 攝于上海精神衛(wèi)生中心


天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院 多聚甲醛固定后50um腦切片視頻


上海藥物所 肝臟切片視頻


東南大學(xué) 200um心臟切片視頻


肺切片視頻


植物切片視頻


切片機(jī)使用技巧:

先按照操作視頻,了解正確使用,收到機(jī)器裝上刀片和樣品即可,如果沒(méi)有使用經(jīng)驗(yàn),可以用瓊脂塊或者土豆塊來(lái)做操作熱身。對(duì)于新鮮動(dòng)植物組織的切片會(huì)碰到兩種問(wèn)題:新鮮樣品的安裝和切片核心三要素的確定:1刀片角度;2 振動(dòng)幅度;3 進(jìn)刀速度。

新鮮樣品的安裝建議

   新鮮軟組織先用吸水紙去除表面多余水份,為了最大可能保持樣品原有形狀,避免變形導(dǎo)致切片不理想。盡量準(zhǔn)備一個(gè)和樣品大小類(lèi)似的樣品槽(可以用瓊脂塊和塊狀植物挖槽)或者阻擋物(可以用瓊脂塊和塊狀植物挖槽)。

切片核心三要素的確定

   首先確定不同樣品最佳的切口角度,如果對(duì)樣品不了解,可以將振幅調(diào)大,進(jìn)刀速度減慢,仔細(xì)觀(guān)察比較不同角度(10°、15°、20°等)哪個(gè)角度刀片比較容易切入。確定好角度后,再去調(diào)整振幅和進(jìn)刀速度,新手普遍進(jìn)刀速度偏快,請(qǐng)稍微耐心點(diǎn),最后再比較不同振幅和進(jìn)刀速度得到的切片質(zhì)量,然后做調(diào)整,按照有序步驟反復(fù)操作和琢磨幾次應(yīng)該就可以掌握切片要領(lǐng)了。



主要特點(diǎn)

       ZQP-86型振動(dòng)切片機(jī),它廣泛地應(yīng)用于科研、教學(xué)、化工、醫(yī)療衛(wèi)生等單位。振動(dòng)切片機(jī)專(zhuān)切新鮮的或經(jīng)過(guò)固定的動(dòng)、植物標(biāo)本,切片時(shí)組織標(biāo)本不需冰凍或包埋。為此,樣品片避免了冰晶破壞,還能保持樣品活性和細(xì)胞良好形態(tài)。給“免疫細(xì)胞化學(xué)研究”以及“脊髓和腦薄片的神經(jīng)生物學(xué)研究”提供了良好條件,是當(dāng)代電鏡、解剖、組胚、生理、醫(yī)院、化工等實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)理想的快速制樣理想切片儀器。

       用振動(dòng)切片機(jī)(vibratome)將新鮮組織(不固定、不冷凍)切片,以漂浮法在反應(yīng)板內(nèi)進(jìn)行組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)染色。因組織不冷凍,無(wú)冰晶形成也無(wú)組織抗原破壞,染色前又避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對(duì)抗原的損害,故能較好地保留組織內(nèi)脂溶性物質(zhì)和細(xì)胞膜抗原。振動(dòng)切片主要用于顯示神經(jīng)系統(tǒng)抗原分布的研究。對(duì)于柔軟的胚胎腦組織,可用低熔點(diǎn)(45—55℃)10%瓊脂糖包埋,振動(dòng)切片機(jī)切成厚片(100—400μm),采用漂浮法在反應(yīng)板內(nèi)進(jìn)行免疫熒光組織化學(xué)染色,激光掃描共聚焦顯微鏡觀(guān)察。 

      振動(dòng)切片與石蠟切片和冷凍切片比較,切片厚度范圍更廣,可以滿(mǎn)足100um以上的切片要求,切片保持原有更佳的組織特性。

   

 產(chǎn)品參數(shù)
      1.切片機(jī)速度:0-1.3mm/s(無(wú)級(jí)調(diào)速) 
      2.振動(dòng)幅度:0-1mm(可調(diào)) 
      3.標(biāo)本臺(tái)升降范圍:20mm 
      4.切片厚度微調(diào)(小):1μm
      5.切片刀角度任意可調(diào)
      6.電源(交流):220V±10% 
      7.工作電源(直流):24V 
      8.功率:30W 
      9.外形尺寸(mm):360×220×220

案例


復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院董強(qiáng)和崔梅團(tuán)隊(duì)

Paranodal instability driven by axonal mitochondrial accumulation in ischemic demyelination and cognitive decline Molecular Psychiatry - Nature 上于03 March 2025在線(xiàn)發(fā)表。

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Dl-3-n-ButylphthalideAlleviates Demyelination and Improves Cognitive Function by PromotingMitochondrial Dynamics in White Matter Lesions在Frontiers in Aging Neuroscience 上于08 March 2021在線(xiàn)發(fā)表。

   該研究通過(guò)探索丁苯酞(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“NBP”)對(duì)腦白質(zhì)病變模型小鼠(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“WML”)認(rèn)知功能和神經(jīng)脫髓鞘的影響,證明了NBP能夠通過(guò)WML的潛在治療靶點(diǎn)——抑制線(xiàn)粒體弓形蛋白(SNPH)來(lái)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,同時(shí)通過(guò)促進(jìn)線(xiàn)粒體動(dòng)力學(xué)變化顯著緩解WML模型的脫髓鞘程度并改善其空間學(xué)習(xí)能力和記憶功能。
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國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)ZQP-86在驗(yàn)證腦卒中中醫(yī)電針療法中的應(yīng)用

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國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)ZQP-86 30um肺腫瘤切片實(shí)例

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  • 國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)ZQP-86 小鼠 Fresh tumor and liver tissue 切片實(shí)例

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  • 國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)ZQP-86 小鼠腎臟切片實(shí)例

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  • 國(guó)產(chǎn)振動(dòng)切片機(jī)ZQP-86根系切片實(shí)例

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2 儀器的保養(yǎng)

振動(dòng)切片機(jī)的日常保養(yǎng)包括除菌、清潔、更換刀片、定期校準(zhǔn)等工作。

儀器的除菌主要是刀片、樣品頭、刀架以及控制面板的除菌,刀片、樣品頭和刀架在使用完畢后先用清水沖洗干凈,擦拭乙醇進(jìn)行消毒,控制面板在乙醇擦拭后再用干凈抹布進(jìn)行清潔。清潔工作主要是針對(duì)刀架、樣品托以及冰浴槽。刀架的清潔尤為重要,由于刀片的安裝、固定、調(diào)節(jié)都通過(guò)刀頭上的螺栓調(diào)節(jié),而在蔗糖溶液較多時(shí)如不及時(shí)清潔,下次使用時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)螺絲被黏住的現(xiàn)象。冰浴槽若不及時(shí)清理,長(zhǎng)時(shí)間使用會(huì)對(duì)槽底金屬形成腐蝕。樣品托每次用完后要及時(shí)剔除粘合劑及樣本殘漬以保證下次樣品的水平安放。

3 常見(jiàn)問(wèn)題、原因及解決方法:

制作高質(zhì)量的組織切片,需要在長(zhǎng)期的練習(xí)、實(shí)踐中摸索經(jīng)驗(yàn),本文總結(jié)了在使用過(guò)程中出現(xiàn)的常見(jiàn)問(wèn)題、產(chǎn)生原因及解決方法:

3.1 問(wèn)題:切片有劃痕;可能原因:刀片有缺口或刀片表面不清潔;解決方法:更換刀片或使用完好的刀片區(qū)域;

3.2 問(wèn)題:切片厚度不均:可能原因:刀片角度不合適,刀片未完全固定或者組織與樣品盤(pán)未完全粘結(jié);解決方法:調(diào)整刀片角度或切片速度,檢查刀片螺栓,重新粘結(jié)組織與樣品盤(pán);

3.3 問(wèn)題:切片無(wú)法粘在載玻片上,可能原因:載玻片事先未進(jìn)行過(guò)明膠化處理;解決方法:使用已經(jīng)明膠化處理過(guò)的載玻片;

3.4 問(wèn)題:組織切片形態(tài)被破壞;可能原因:組織過(guò)于柔軟未完全固定,或切片速度低,振幅偏小;解決方法:對(duì)于需固定的組織,需要增加固定時(shí)間,而對(duì)于新鮮軟組織則需要適當(dāng)?shù)恼{(diào)整切片的速度和振幅;

3.5 問(wèn)題:切片振顫或有雜音;可能原因:組織未能與樣品盤(pán)完全粘結(jié),刀片未完全固定,組織過(guò)硬且不均一;解決方法:重新粘結(jié)組織與樣品盤(pán),檢查刀片螺栓,增加切片厚度;

3.6 問(wèn)題:切片開(kāi)裂或發(fā)生卷曲;可能原因:組織表面過(guò)大,刀片損壞或表面過(guò)臟;解決方法:修整組織表面,增加切片厚度,更換刀片或刀片位置,用干凈的刷子清潔刀片;


4 注意事項(xiàng):

4.1 切片速度及振幅的選擇:

根據(jù)切片的原則,對(duì)于越軟的組織,就需要越慢的切片速度,越高的振幅和頻率,以及越鋒利的刀片和冷的組織緩沖液。

4.1.1 對(duì)于未經(jīng)過(guò)固定的新鮮軟組織,切片速度通常不超過(guò)0.1m m/s,振幅通?刂圃1.0m m/s以上;

4.1.2 對(duì)于經(jīng)過(guò)固定的組織, 切片速度可提高, 振幅通?刂1.0mm/s以?xún)?nèi);

4.2 切片前,應(yīng)首先將組織樣品固定在樣品盤(pán)上,待固定好冰槽后再安裝刀片,以免操作過(guò)程中被刀片劃傷; 切片結(jié)束后,則應(yīng)首先卸下刀片,再處理樣品盤(pán)上的殘留組織塊,清洗樣品盤(pán)和冰槽;

4.3 對(duì)于新鮮的軟組織,可以用低熔點(diǎn)(45—55℃)10%瓊脂糖包埋,以利于切片展開(kāi);


5 樣品制備(引自中國(guó)科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)卓越創(chuàng)新中心

樣品制備的操作成功與否直接關(guān)系到整個(gè)實(shí)驗(yàn)的成敗。  

5.1 取材的基本要求:快、冷、小、凈、準(zhǔn)。 
  快:就是指在血液未停止流動(dòng)(未凝血)前取材。因?yàn)橐坏┙M織失去血流供應(yīng),細(xì)胞就處在缺氧狀態(tài),代謝發(fā)生改變,細(xì)胞內(nèi)的一些酶將釋放出來(lái)使細(xì)胞自溶,破壞超微結(jié)構(gòu)形態(tài)。所以當(dāng)組織離體后應(yīng)即刻予以固定。 
  冷:在取材時(shí)盡量保持低溫操作,使酶的作用降低,減少對(duì)細(xì)微結(jié)構(gòu)的影響。一般要求取材溫度控制在0-4℃。 
  。由于受電鏡固定液及包埋劑滲透速度的影響,因此,一般不允許組織塊的大小超過(guò)1mm3。取材時(shí)動(dòng)作要輕,刀鋒要利,切組織時(shí)刀片沿著一個(gè)方向切,避免任何牽拉和擠壓造成的機(jī)械損傷。 
  凈:盡量少帶血液和組織液進(jìn)入固定液。但切忌用水直接沖洗,可用緩沖液(0.1M PBS)或等滲鹽水(0.9%NS)把表面的血液和組織液輕輕沖掉。 
  準(zhǔn):為避免“一孔之見(jiàn)”等電鏡研究固有的局限性,要求在取材時(shí)選擇部位準(zhǔn)確可靠,即取材的組織小塊必須為要求觀(guān)察的部位。 

5.2 具體方法: 
  1.組織固定法: 
固定組織的方法為心臟灌注法,固定液的選擇與不同的神經(jīng)遞(調(diào))質(zhì)有關(guān),一般來(lái)說(shuō),對(duì)于神經(jīng)肽以及分子量較大的多肽和蛋白質(zhì),用含4%多聚甲醛、0.1-0.5%戊二醛或0.2%苦味酸的0.1M磷酸緩沖液(PB)(PH7.2-7.4)。組織固定法以大鼠為例,首先用50毫升生理鹽水(37℃)清洗血液,接著用50毫升固定液(37℃)快速灌注固定,然后用250-300毫升冷固定液(4℃)慢速灌入,持續(xù)10-15分鐘后取材,置組織于同樣固定液中,在4℃冰箱中后固定。 
  2.振動(dòng)切片: 
將所需組織修成適當(dāng)大小的組織塊,為了易于切片,組織塊的高度不應(yīng)超過(guò)其長(zhǎng)或?qū)挾,?02膠將組織粘于振動(dòng)切片機(jī)的樣品臺(tái)上,盡量將組織塊中的重要部分迎向切片刀口(市場(chǎng)上的雙面剃須刀)。切片厚度為50-70微米。 
  3.實(shí)質(zhì)性器官:實(shí)質(zhì)性組織切成正方體小塊2×2×2mm3。組織塊被剪刀剪切或鑷子夾過(guò)的部分棄去,然后用牙簽將組織小塊輕輕挑起,放入裝有固定液的小管中浸泡固定。也可用鑷子借液體的張力移取組織塊,注意不可用力夾。小管置于4℃冰箱中保存。每份樣本的組織小塊需≥5塊。例如: 
肝臟:切除被膜,切成立方體小塊。 
腎臟:分為皮質(zhì)與髓質(zhì)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求取相應(yīng)部位,切除包膜,切成立方體小塊。 
肺臟:同肝臟取材,但因肺中有大量的肺泡及細(xì)支氣管,所以在固定時(shí)小塊會(huì)漂浮在固定液液面上,需用空針抽真空,使小塊完全浸沒(méi)在固定液中。 
  4.有方向性的器官:切成長(zhǎng)方體小塊(1×1×2 mm3)。 上陰影部分)! 
腸、血管:此類(lèi)管腔型組織,在固定時(shí)要將其剖開(kāi),使內(nèi)膜面得以充分的固定,如不剖開(kāi)而直接浸在固定液中,由于固定液滲透時(shí)間的影響,進(jìn)入內(nèi)膜面需要一定時(shí)間,這樣內(nèi)膜面的超微結(jié)構(gòu)已經(jīng)改變。管腔型組織需切成長(zhǎng)方體小塊, 
肌肉、神經(jīng):此類(lèi)組織也存在橫切和縱切的差別,所以也要切成長(zhǎng)方體小塊。 
心臟:如果可辨清肌纖維方向,則按照肌肉取材。否則同肝臟取材。 
  5.培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌的電鏡樣品制備: 
將細(xì)胞連同培養(yǎng)液放在尖頭離心管中離心5min,2 000r/min,后棄上清液,加入4%多聚甲醛(0.1mPBS配制,pH7.4),并用滴管輕輕吹打,使細(xì)胞懸浮于固定液中,并在4℃下固定4h和過(guò)夜。由于電鏡樣本制備過(guò)程中會(huì)不可避免地?fù)p失掉一部分細(xì)胞,因此細(xì)胞必須達(dá)到一定數(shù)量,即為離心后細(xì)胞量至少為黃豆樣大小。 


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